納米抗體制備由重鏈可變區(qū)組成，無輕鏈和復雜的恒定區(qū)結(jié)構(gòu)，易于通過基因工程進行改造和表達，可在原核和真核細胞中低成本大規(guī)模生產(chǎn)；耐高溫、強酸、強堿等致變性條件，有利于在不同環(huán)境下保持活性，便于儲存和運輸。
 

　　其CDR3環(huán)通常更長，可有效彌補因缺失輕鏈造成的結(jié)合界面損失，能更緊密地結(jié)合抗原，且不含有多余冗雜結(jié)構(gòu)，僅保留了最關鍵的抗原結(jié)合活性部位，并被保守的框架區(qū)包圍，形成獨特的凸狀或口袋狀空腔，從而具有高親和力；由于其結(jié)構(gòu)簡單，更容易進行人源化改造，降低免疫原性，提高其在人體中的安全性和有效性。
 

　　納米抗體制備的步驟：
 

　　-動物免疫：選擇健康的羊駝或駱駝等合適的實驗動物，通常選年輕且免疫系統(tǒng)完好的個體。在實驗前對其進行健康評估，包括體溫、體重、血液學和生化指標檢測等。將目標抗原免疫到動物體內(nèi)，激發(fā)其免疫系統(tǒng)產(chǎn)生對目標抗原特異性的天然抗體。
 

　　-獲取抗體基因：從免疫后的動物外周血B淋巴細胞中提取RNA，反轉(zhuǎn)錄獲取cDNA，以cDNA為底物PCR擴增獲取多樣化納米抗體基因片段。
 

　　-構(gòu)建噬菌體庫：將多樣化納米抗體基因片段連接到噬菌粒上，構(gòu)建噬菌體庫。
 

　　-篩選與驗證：通過噬菌體展示和篩選技術(shù)從抗體庫中篩選得到適合的候選納米抗體，并對其進行驗證。
 

　　-表達與純化：選擇合適的表達系統(tǒng)，如原核表達系統(tǒng)中的大腸桿菌，或哺乳動物細胞表達系統(tǒng)中的CHO細胞、HEK293細胞等，將表達載體導入相應的細胞中進行納米抗體的表達。之后采用親和純化、尺寸排阻等方法對表達的納米抗體進行純化。